Сочинение на тему Защитный эффект при длительном применении гуммиарабика
- Опубликовано: 06.09.2020
- Предмет: Литература
- Темы: Араби, книги
Действие ключевых катализаторов укрепления клеток предполагает основную роль в принятии вреда ткани, вызванного гипергликемией [1]. Окислительное давление, вызванное однобокостью окислителей / агентов, предотвращающих рак, наносит вред органическим макромолекулам, включая крахмалы, белки, липиды и нуклеиновые кислоты, вызывает ухудшение гомеостаза клеток и образование других рецептивных атомов, которые вызывают большее повреждение [2]. Значение окислительного давления и его связь с патологией сахарного диабета (СД) наряду с сопутствующими сложностями были широко исследованы [1,3]. Прошлые исследования показали, что генерация активных форм кислорода (АФК) при диабете приводит к улучшению постоянных диабетических язв на кровеносных сосудах [4], сетчатке [5], почках [6] и нейродегенеративных заболеваниях [7].
СД является постоянной и наиболее регулярной метаболической проблемой, которая в XXI веке оказалась пандемией [8]. Около 347 миллионов человек были подвержены влиянию DM в 2011 году [9]. Всемирная ассоциация благополучия предсказывает, что диабет станет седьмой движущей причиной смерти в 2030 году. Окислительное беспокойство при СД вызывает несколько неблагоприятных последствий для физиологии клетки [10]. Он снижал уровень глутатиона (GSH) при диабете [11], уменьшал активность каталазы [12], снижал уровень почечной СОД [13] и повышал уровень белка теплового шока 70 (HSP70) у пациентов с СД 2 типа [14]. Окислительное давление считается ключевым фактором в начале патогенеза и диабетических сложностей [15]. Клинические и аналитические исследования показали, что в долгосрочной перспективе СД может поражать СД [16–18]. Гистологические признаки жировой болезни печени, вызванной СД, и неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП) не могут быть выявлены в результате вызванного этанолом стеатоза печени [18].
Гуммиарабик (GA) – это расходуемый, высушенный липкий экссудат из Acaciaseyal, а Acacia Senegal богат неволосатым волокном растворителя. Обычно его используют как часть пищевой промышленности и фармацевтики в качестве эмульгатора и добавки [19]. В Северной Африке и на Ближнем Востоке он используется в качестве специалиста по чистоте полости рта различными группами в течение нескольких столетий [20]. GA используется как часть фармацевтического препарата в арабском обществе для уменьшения рецидивов и необходимости гемодиализа у пациентов с непрекращающейся почечной недостаточностью [21]. Он обладает твердыми свойствами для профилактики рака и используется для снижения тестовой нефротоксичности в отношении гентамицина [21], цисплатина [22] и для улучшения кардиотоксичности [23]. Как бы то ни было, влияние GA на окислительное беспокойство в печени крыс с диабетом I типа не было учтено. Независимо от того, может ли GA изменить окислительно-связанные качества, артикуляция в печени диабетических грызунов I типа остается менее ясной.
Следовательно, в настоящем исследовании мы использовали модель диабетических грызунов I типа для изучения наших предположений о том, что добавление ГА в питьевую воду может обезопасить печень за счет уменьшения окислительного вреда, а уменьшение окислительного вреда может быть связано с балансом печени. окислительно-связанные качества артикуляции.
Обоснование исследования:
В настоящем исследовании мы стремимся использовать модель диабетических крыс, чтобы проверить, будет ли добавление ГА к терапии инсулином ослаблять вызванные диабетом изменения функции печени и опосредуется ли действие воздействием на маркеры окислительного стресса. < / р>
<Р> 2. Материал и методы:
2.1 Животные. Всего в исследование было включено 60 самцов крыс Sprague-Dawley (возраст 5-6 недель) весом 200 ± 10 г. Животных содержали в помещении для животных в контролируемой среде с циклом свет / темнота 12: 12. Животные были акклиматизированы за одну неделю до исследования и имели свободный доступ к воде и стандартному корму для крыс в течение всего экспериментального периода.
2.2. Животные. Это исследование проводилось в соответствии с рандомизированным экспериментальным планом с контролируемыми животными. 60 самцов крыс Sprague-Dawley, включенных в это исследование, были разделены на 6 групп (n = 10 в каждой) следующим образом:
[A] Контрольные группы:
<Р> 1. Необработанный контроль (C): крысам однократно внутрибрюшинно вводили только цитратный буфер.
<Р> 2. Контрольный обработанный гуммиарабиком (GAC): крысам внутрибрюшинно вводили буфер в качестве группы «С» и получали 10% мас. / Об. Гуммиарабика в питьевой воде.
[B] Экспериментальные группы:
<Р> 1. Не леченная диабетическая группа (D): диабетическая группа не получала ни инсулина, ни GA.
<Р> 2. Диабет + инсулин (DI): крысы получали только инсулин.
<Р> 3. Диабет + GA (DGA): крысы получали GA только после индукции диабета.
<Р> 4. Диабет + инсулин + GA (DIGA): крысы получали инсулин и GA после индукции диабета.
2.3 Индукция сахарного диабета (СД):
Сахарный диабет I типа (СД) был индуцирован, как описано в [24]. Вкратце, после голодания в течение ночи вводили однократную внутрибрюшинную инъекцию (т.е.) стрептозотоцина STZ (65 мг / кг) в свежеприготовленный цитратный буфер (0,1 М, рН 4,5) (Sigma Chemical Company, США). СД проверяли путем измерения уровня глюкозы в крови у выживших крыс через 3 дня путем отбора крови из хвоста / шеи. Крысы с уровнем глюкозы в крови натощак = 20 ммоль / л через 48 ч после инъекции STZ считались диабетиками [25]. Экспериментальный период составлял 12 недель, период, который, как было доказано, вызывает обнаруживаемые диабетические осложнения в почках [26].
2.4 Подготовка ткани
Крыс анестезировали пентобарбиталом натрия (60 мг / кг массы тела, внутрибрюшинно). Печень была удалена, очищена от грубой адвентициальной ткани, высушена до блота и обработана для биохимических измерений. Ткань гомогенизировали в 50 мМ фосфатном буфере (рН 7,4) с использованием гомогенизатора Polytron. Полученный супернатант использовали для измерения реактивных веществ тиобарбитуровой кислоты (TBARS) и антиоксидантных ферментов. Уровни TBARS измеряли как показатель продукции малонового диальдегида, а затем оценивали перекисное окисление липидов в тканях методом Yagi [27], как описано ранее [28].
2.5 Оценка активности печеночного антиоксидантного фермента
Коммерческие реагенты на основе супероксиддисмутазы (SOD), глутатионпероксидазы (GPx), каталазы (CAT) и глутатиона (GSH) были приобретены у Sigma Chemical Company, США. Ткани печени (1 г) разрезали на мелкие кусочки и гомогенизировали в охлажденном льдом солевом буфере (0,85%, pH 7,4) (1: 9, мас. / Об.) С помощью Ultra-Turrax (T8, IKA-labourtechnik Staufen, Германия) , Гомогенаты печени центрифугировали при 1000 g в течение 15 минут при 4 ° С и супернатанты собирали. Супернатанты использовались для анализов SOD, GPx, CAT и GSH. Антиоксидантный статус печени оценивали путем измерения уровня различных антиоксидантов в печени. Активность СОД измеряли по методике [29]. Активность GPx и CAT измеряли методами, описанными в [30] и [31] соответственно. Все анализы измерялись с помощью наборов для анализа клинической химии в соответствии с рекомендуемой изготовителем процедурой. Антиоксидантная активность как функция окислительного стресса в ткани печени была определена в соответствии с информацией производителей; каталаза (abcam-ab83464, набор для анализа каталазы – колориметрический / флуорометрический), супероксиддисмутаза (Cayman Chemical – набор для определения супероксиддисмутазы – номер позиции 706002), малоновый диальдегид (abcam-ab118970- набор для анализа перекисного окисления липидов (MDA) – флуориметрический и колориметрический) глутатион (SIGMA-ALDRICH- набор для анализа глутатиона – каталожный номер. CS0260). Полученные результаты были проанализированы с помощью SPSS версии 20. Средние значения параметров двух групп были проанализированы с помощью t-критерия.
<Р> 2,6. Извлечение РНК и ПЦР в реальном времени
Около 100 мг печени измельчали в жидком N2, а порцию около 50 мг использовали для экстракции РНК с использованием набора тотальной РНК TRIzol (Invitrogen, Biotechnology Co., Ltd., Карлсбад, Калифорния, США) в соответствии с инструкция производителя. Два подхода были предприняты, чтобы гарантировать, что все препараты полной РНК не содержат геномной ДНК. Сначала суммарные РНК обрабатывали 10 U ДНКазой I (RNase Free, D2215, Takara, Japan) в течение 30 минут при 37 ° С и очищали в соответствии с протоколом производителя. Во-вторых, праймеры для эталонного гена (-актин) были спроектированы так, чтобы охватить интрон, поэтому можно легко сообщать о любом загрязнении геномной ДНК с помощью дополнительного продукта на кривых плавления для ПЦР в реальном времени. ПЦР в реальном времени проводили в Mx3000P (Stratagene, США) в соответствии с предыдущими публикациями [32,33]. Праймеры, специфичные для СОД и gGCL (таблица 1), были синтезированы Geneary (Шанхай, Китай), а крысиный -актин был использован в качестве эталонного гена для целей нормализации. Метод 2-Ct использовался для анализа данных ПЦР в реальном времени [34]. Содержание мРНК было представлено как кратное изменение относительно среднего уровня контрольной группы.
<Р> 2,7. Этическое разрешение:
Это исследование было проведено после получения академического и этического одобрения медицинского факультета Университета Аль-Нилайн-Хартум, Судан.
<Р> 2,8. Статистический анализ
Описательные статистические данные были выполнены для проверки нормальности и однородности отклонений перед использованием параметрического анализа. Данные были проанализированы с использованием статистической программы SPSS. Значения выражены как частота, процент и среднее значение ± стандартное отклонение. Тестирование значимости было выполнено с использованием 2 тестов и одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA). Значения P = 0,05 считались статистически значимыми.
<Р> 3. Результаты
<Р> 3,1. Влияние GA на активность антиоксидантных ферментов печени
Были измерены ключевые антиоксидантные ферменты, включая SOD, CAT и GPx печени крысы. Антиоксидантная активность как функция окислительного стресса в ткани печени в шести группах представлена на рисунках 1-4. Значения (среднее значение ± стандартное отклонение), полученные для уровней восстановленного глутатиона (GSH) в печени группы крыс, обработанных гуммиарабиком были значительно различны по сравнению с контрольной группой. Кроме того, у крыс с СД, получавших инсулин и гуммиарабик, также наблюдались значительные различия (рис. 1). Группа крыс с диабетом показала значительное снижение активности всех антиоксидантных ферментов по сравнению с контролем. Уровни общей супероксиддисмутазы (SOD) в печени экспериментальных групп крыс показали различную тенденцию, при которой у крыс с сахарным диабетом не наблюдалось какого-либо значительного увеличения SOD при лечении гуммиарабиком, однако добавление инсулина с гуммиарабиком к диабетическим крысам увеличилось СОД очень значительно (рисунок – 3). Наконец, уровни каталазы (CAT) показали очень значительное увеличение у диабетических крыс, получавших инсулин и гуммиарабик отдельно или в комбинации (рис. 4). Однако лечение GA значительно (P <0,05) увеличивало активность антиоксидантных ферментов, включая SOD, CAT и GPx, по сравнению с контрольной и диабетической группами.
<Р> 3,2. Влияние GA на перекисное окисление липидов в печени
Малоновый диальдегид (МДА) в качестве биомаркера окислительного стресса обычно используется для оценки степени перекисного окисления липидов. В настоящем исследовании мы наблюдали значительное увеличение концентрации MDA в печени в группе диабетиков по сравнению с контролем. Тем не менее, лечение GA значительно (P <0,05) снизило концентрации MDA по сравнению с группой крыс с диабетом (Рисунок 2). Кроме того, лечение GA значительно увеличивало концентрацию GSH в печени по сравнению с контрольной и диабетической группами крыс. Уровни реактивных кислотных веществ тиобарбитуровой кислоты (GSH) в печени всех экспериментальных групп крыс показали сходную тенденцию, однако их уровни были значительно выше у крыс с диабетом, получавших гуммиарабик и инсулин (рис. 2).
<Р> 3.3. Влияние GA на печеночную экспрессию антиоксидантных генов
Q.PCR использовали для измерения экспрессии мРНК антиоксидантных ферментов в печени. Стрептозотоцин-индуцированный диабет вызывал значительное снижение экспрессии мРНК СОД печени. Тем не менее, лечение GA значительно увеличило экспрессию мРНК печеночной СОД (Рисунок 4) по сравнению с диабетической группой или группой, получавшей инсулин. Кроме того, мРНК значительно увеличилась и достигла уровня контроля у диабетических крыс, получавших инсулин и GA. Аналогичная тенденция наблюдалась в отношении экспрессии мРНК gGLC в отношении мРНК -актина, при которой обработка GA крысами, вызванными диабетом, значительно увеличивала его экспрессию, и она была значительно более значимой, когда GA обрабатывали в комбинации с инсулином
«Как слушатель средневековья, так и читатель XXI века могут не знать, как реагировать на повествовательный голос Жены Бани» Обсудить со ссылкой на Пролог Жены Бата
Как подзаголовок «Современный Прометей» помогает Шелли указать на основополагающее значение ее истории? Работа Мэри Шелли «Франкенштейн» является символическим отражением сомнений и страхов, которые она и
Социальный анализ: искусство войны Может ли война быть в твоей жизни? Может ли это быть в современном обществе? Это должно быть убийство? Ну, война, безусловно,