Бактериальные липазы являются коммерчески более важными, главным образом, из-за легкости их культивирования и оптимизации для получения более высокого выхода. Промышленная потребность в новых источниках липаз с различными каталитическими характеристиками стимулировала выделение и отбор Bacillus subtilis. Это исследование было разработано для изучения физико-химических параметров для оптимизации производства липазы. Микробные липазы катализируют как гидролиз, так и синтез длинноцепочечных ацилглицеринов. В настоящее время им уделяется большое внимание в связи с быстрым развитием ферментных технологий. Характеристика этих ферментов имеет первостепенное значение для установления условий процесса для последующего применения. Для определения оптимального значения рН мы использовали натриево-цитратный буфер с рН 3,3,6 и 5,6 и натрий-фосфатный буфер с рН 7,3 и 8. Изменение рН также изменяет форму фермента. Различные ферменты работают лучше всего при различных значениях рН. Фермент может продолжать связываться с субстратом и продолжать его активность катализаторов. Если pH слишком высокий или слишком низкий, он может изменить форму фермента. Наиболее благоприятное значение pH: точка, в которой фермент является наиболее активным, называется оптимальным значением pH. Чрезвычайно высокие или низкие значения pH обычно приводят к полной потере активности для большинства ферментов. PH также является фактором стабильности ферментов. Как и в случае активности для каждого фермента также существует область оптимальной стабильности рН.
Ключевые слова: липаза, ферменты, Bacillus subtilis, оптимальный, pH.
Введение
Липаза (триацилглицерол-ацилгидролазы, EC 3.1.1.3) – важная группа ферментов, главным образом из-за большого количества промышленных применений. С промышленной точки зрения, ферменты липазы считаются очень важными из-за их большего производственного потенциала в большом масштабе. Выделение липаз подтипами Bacillus из различных образцов почвы, а именно: соевый комбинат Ruchi, Ghatabillod, соевый комбинат Bajrang, Ghatabillod, Мадхья-Прадеш и Dairy, а также характеристика бактерий определяют максимальный продуцент липазы качественными и количественными методами [1]. , Липазы, широко распространенные у животных, растений и микроорганизмов, особенно те, которые происходят от бактерий, более стабильны, чем другие. Многие микроорганизмы известны как хорошие продуценты внеклеточных липаз [2]. Исследования продукции внеклеточных липаз с помощью Bacillus показали различия среди разных штаммов [3].
Липазы широко распространены в бактериях, дрожжах и грибах [4]. Бактериальные липазы коммерчески более важны, главным образом, из-за простоты их культивирования и оптимизации для получения более высокого урожая. Микробные липазы пользуются большим спросом благодаря своей специфичности реакции, стереоспецифичности и меньшему энергопотреблению, чем обычные методы [5]. Липаза с высокой ферментативной активностью может заменить традиционный катализатор при обработке биодизеля, поскольку этот фермент заменяет химические вещества в процессе, который в противном случае является высокоэнергоемким. [6]. Применение липазы также зависит от температуры и стабильности рН. Фермент используется в качестве катализатора для производства различных продуктов, используемых в косметической промышленности [7], в целлюлозно-бумажной промышленности [8], в синтезе биодизеля [9], обезжиривании кожи и в фармацевтической промышленности [10]. Они также используются в органической химической обработке, синтезе биосурфактантов, питании и биомедицинских науках [11]. Фермент липазы также ускоряет созревание сыра и липолиз масла, жира и сливок [12]. В основном они используются в моющей, пищевой, фармацевтической промышленности. Целью данного исследования было получение липазы и определение характеристик фермента с точки зрения его стабильности по отношению к pH и оптимизация условий pH для получения более высокой активности липазы. В настоящем исследовании pH варьировался с использованием различных концентраций субстратов [13]. В связи с их биохимическими свойствами, оба липойских фермента проявляют различную субстратную специфичность [14].
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Сбор образца:
Образец почвы был взят с маслобойни, а именно, соевого комбината Ruchi, Ghatabillod, Bajrang Soya Mill, Ghatabillod, Madhya Pradesh и Dairy. Все образцы были доставлены в стерильные пластиковые пакеты в лабораторию.
Влияние pH на активность фермента:
Профиль активности рН фермента липазы изучали в широком диапазоне от 5,0 до 8,0. 0,01 М цитратный буфер использовали в диапазоне рН 5,0-5,5, тогда как 0,01 М фосфатный буфер использовали в диапазоне рН 6,0-8,0.
5 мл ферментного препарата инкубировали с 10 мл эмульгированного субстрата PVA и 5 мл буфера (фосфат / цитрат) желаемого pH при 37 градусах Цельсия и 100 об / мин в течение 2 часов. Реакцию останавливали в конце периода инкубации, добавляя 30 мл 1: 1 спирт: ацетон раствора к вышеуказанной реакционной смеси, а затем титровали 0,02 н. NAOH в присутствии фенолфталеина в качестве индикатора. Чистые значения были получены путем титрования в идентичных условиях отдельно.
Приготовление заготовки: 5 мл PVA эмульгированного субстрата и 1 мл экстракта фермента. Контроль определяли таким же образом с ферментным препаратом, предварительно инкубированным с 30 мл раствора спирт: ацетон 1: 1 при комнатной температуре в течение 1 часа.
Полимеры представляют собой большие молекулы и имеют одну и ту же структурную единицу, повторяющуюся снова и снова, и эти повторяющиеся единицы известны как мономеры. Эти
Пероксидазы – это оксидоредуктазы, созданные рядом растений и микроорганизмов. Уменьшение количества пероксидаз в непосредственной близости от субстрата, дающего электроны, делает пероксидазы ценными в многочисленных бизнес-приложениях.
Размер первичных частиц ND, полученных методом детонации, хорошо подходит для биомедицинских исследований, продукты детонации должны быть тщательно очищены. В зависимости от материалов и матриц, присутствующих