Сочинение на тему ELISA (метод иммуноферментных анализов)

ELISA или метод иммуноферментного анализа – это тип биохимического анализа, основанный на принципе иммуноферментного анализа или EIA. В иммуноанализе ELISA используются ферменты, которые содержат сопутствующее антитело или антиген, которые можно использовать в качестве маркера для обнаружения. Как правило, метод ELISA начинается, когда слой антигена помещают в лунки планшета для микротитрования, затем используют промывочный буферный раствор для промывки любых несвязанных антигенов. В лунки добавляют энзим-конъюгированное антитело, которое также промывают промывочным буфером, чтобы избавиться от избытка несвязанного. Затем в лунке используется блокирующий буфер, так что любые незанятые сайты связывания белка в лунках будут блокироваться, чтобы убедиться в отсутствии ложных срабатываний. После того, как вторичное антитело, конъюгированное с ферментом, добавляется в лунки, и предполагается, что реакция субстрата с ферментом приводит к образованию окрашенного продукта. ИФА является чувствительным тестом, который зависит от усиления сигнала во время аналитической реакции.

Это 4 основных типа ИФА:

Прямой ИФА устанавливается, когда образцы, содержащие антитела или белки, представляющие интерес, добавляются в лунки и инкубируются так, чтобы антиген связывался с поверхностью лунки. После инкубационного периода в лунки добавляется промывочный буфер и опрокидывается. Затем в лунки добавляется «блокирующий» раствор. Вскоре после этого в лунку добавляют антитело, конъюгированное с ферментом, после чего проводят вторичную промывку и инкубацию. Добавляется субстрат, и взаимодействие фермент-субстрат вызывает изменение цвета.