Сочинение на тему Выяснение видов происхождения конфискованного мяса с использованием ДНК-криминалистики
- Опубликовано: 02.09.2020
- Предмет: Наука, преступление, Социальные вопросы
- Темы: генетика, ДНК, защита, Права животных, Эссе о браконьерстве
Аннотация
Браконьерство в дикой природе для местного потребления и в коммерческих целях представляет собой серьезную угрозу потере биологического разнообразия в мире, которое даже привело к истреблению многочисленных видов в местном или региональном масштабе. Правоохранительные органы работают над реализацией Закона о защите дикой природы для борьбы с незаконной торговлей дикой природой запчастями и продуктами по всему миру. Тем не менее, несколько раз конфискованные материалы были изменены и изготовлены настолько, что их морфологическая идентификация часто становилась трудной. В последние несколько десятилетий технология ДНК произвела революцию в идентификации видов в судебно-медицинских экспертизах и показала свою силу в надежной идентификации этих изготовленных материалов. Мы получили конфискованный материал, по-видимому, нарезанное сырое мясо без каких-либо нетронутых морфологических признаков. Обвиняемые были задержаны должностными лицами Государственного департамента лесного хозяйства после того, как он разместил в социальных сетях фотографии с изображением его причастности к приготовлению и употреблению мяса животных, предположительно имевшего происхождение от дикой природы. При поиске гомологии мы обнаружили 99% идентичность конфискованного материала с азиатской пальмовой циветтой (Paradoxurus hermaphroditus) и соседними деревьями, основанными на генетических расстояниях, которые сгруппировали последовательность запросов с азиатской пальмовой циветтой с поддержкой 100% начальной загрузки. Настоящее исследование дает надежду на установление идентификации видов по переработанному мясу в надежной оценке для судебной экспертизы дикой природы. Это тематическое исследование расширяет роль аутентифицированных ссылок, доступных в общедоступной базе данных, подчеркивая применение криминалистической экспертизы ДНК при идентификации видов даже из фенотипически измененных материалов.
Ключевые слова: криминалистика дикой природы; Штрих-кодирование ДНК; Азиатская пальмовая циветта; 12S рРНК; Ген CytB.
Введение
Браконьерство диких животных на мясо, кожу, кости и другие части тела является одной из древнейших культур на пути человеческой цивилизации и эволюции. Эта регулярная практика с включением коммерческой жадности человечества привела к потере биоразнообразия и вымерла несколько видов, таких как Javan Rhino, Western Black Rhino, Passenger Pigeon или почти вымерли, как Pink Headed Duck, Hangul. Несмотря на то, что все дикие животные в Индии защищены законом о защите дикой природы 1972 года, тем не менее, незаконное браконьерство и торговля частями и продуктами для диких животных по-прежнему молчаливо, а несколько животных ежегодно подвергаются браконьерству.
Экспертиза в криминалистике, основанная на морфологических и иммунологических признаках, имеет ограниченные возможности в установлении видов и индивидуальной идентичности с использованием традиционных методов. В криминалистике дикой природы идентификация видов по частям и продуктам, которые часто изменяются и обрабатываются в несколько раз, становится сложной задачей с использованием традиционных методов даже для обученного и квалифицированного биолога. Зачастую образцы, полученные для идентификации, либо слишком старые, либо разлагаются, либо изменяются на куски, что затрудняет определение идентичности видов. Таким образом, идентификация на основе ДНК становится полезным инструментом для исследования конфискованных образцов дикой природы с измененной морфологической идентичностью. Митохондриальные гены, такие как CoI (Hebert et al. 2003; Khedkar et al. 2016) и CytB, 16S рРНК и 12S рРНК, использовались для удовлетворения потребностей в идентификации видов из конфискованных материалов и доказали свою надежность для идентификации видов по разнообразию образцы с нарушенной морфологической идентичностью. Настоящее исследование было направлено на выявление видов происхождения из измененного конфискованного материала, с тем чтобы представить технические консультативные материалы для судебного преследования в судебных процессах в суде и для осуществления Закона о защите дикой природы 1972 года в Индии.
Презентация дела
Человек из Пальты (округ Северная 24 Парганас), штат Западная Бенгалия, Индия, подозревался в браконьерстве с животным дикого происхождения, так как он был пойман лесным отделом после того, как он загрузил несколько своих фотографий в процессе убийства и готовится готовить диких животных в социальных сетях. Государственный департамент лесного хозяйства арестовал его сразу после того, как в социальных сетях было совершено немедленное ажиотажное преступление в связи с нарушением Закона о защите дикой природы 1972 года. Подразделение, занимающееся лесопользованием на севере 24 Парганаса, Западная Бенгалия, конфисковало мясо, предположительно дикого происхождения, и отправило в зоологическую службу Индия, Калькутта для идентификации видов, чтобы можно было начать судебное разбирательство. Материалы и методы. Мы взяли пробный образец мяса, нарезали его на мелкие кусочки, закодировали как «ZSI / FI / 2017/11» и промыли в течение ночи 1X стерильным физиологическим раствором с фосфатным буфером (PBS). Выделение геномной ДНК проводили методом фенол-хлороформ-изоамиловый спирт (PCI). Универсальные праймеры генов цитохрома B и 12S рРНК были использованы для амплификации этих генов для идентификации на уровне видов. Продукты ПЦР очищали с использованием обработки Exo-SAP и проводили циклическое секвенирование независимо для прямого и обратного праймера с использованием набора для секвенирования цикла терминатора Big Dye v3.1 (Applied Biosystems, США). Секвенирование проводили на генетическом анализаторе 3730. Качество последовательности проверяли нуклеотидом вручную по нуклеотиду и проверяли с использованием Sequencher v4.7 (www.genecode.com). Полученные последовательности были отправлены в базу данных NCBI / BOLD. Гомологичные последовательности были загружены из поиска NCBI / BLAST, и множественное выравнивание последовательностей для всех загруженных последовательностей было выполнено с помощью инструмента выравнивания MUSCLE в MEGA6 (Tamura et al., 2013). Для филогенетического построения мы определили модель наилучшего соответствия на основе значения BIC для всех загруженных и сгенерированных последовательностей, и деревья соседних соединений (NJ) были построены в MEGA6 с использованием модели Тамура-Ней с гамма-распределением.
Результаты
NA из конфискованного образца мяса успешно выделена с использованием метода PCI и визуализирована на 1% агарозном геле. ПЦР-амплифицированный фрагмент генов CytB и 12S рРНК визуализировали (на 2% агарозном геле) в виде отдельных одиночных полос ДНК между полосами от 250 до 500 п.н. по лестнице 1 кБ. При поиске BLAST для обоих генов последовательности запросов показали 99-процентную идентичность с последовательностями азиатской Pam Civet (Paradoxurus hermaphroditus). Генетическая матрица расстояний для обоих генов показала, что подозреваемый конфискованный материал имеет самое близкое генетическое сходство (DA 0,011 Nei для гена CytB) и (DA 0,012 Nei для 12S рРНК) с известными последовательностями азиатских пальмовых циветт, Paradoxurus hermaphroditus и деревьев NJ, продемонстрированных эти последовательности запросов тесно связаны с известными последовательностями азиатской Pam Civet (Paradoxurus hermaphroditus) со 100% поддержкой начальной загрузки. Следовательно, это было подтверждено коллективными доказательствами, такими как поиск гомологии в базе данных NCBI / Genbank, генетические расстояния и анализ филогенетического дерева, что конфискованный материал относится к азиатскому пальмовому происхождению Civet Origin Paradoxurus hermaphroditus, который является запланированным видом (Список II) и защищен дикой природой (Защита). ) Закон 1972 года и широко распространен в штате Западная Бенгалия. Отчет об идентификации видов был передан в управление лесного департамента Западной Бенгалии.
Обсуждение
Хотя несколько более ранних исследований показали применимость штрих-кодирующих генов для быстрой и надежной криминалистической идентификации, настоящее исследование показало значительную роль в идентификации видов из сырого мяса, которые не имели какой-либо морфологической идентичности (таких как волосы, ногти или череп) слева. Следовательно, текущее исследование породило новую надежду, показав, что документирование идентификации видов возможно даже для сырого мяса для надежной оценки судебно-медицинских экспертиз. Декларация интересов: Авторы заявляют, что у них нет конфликта интересов.
Использование редактирования и изменения генома для разработки и конструирования атрибутов будущих детей было поддержано и одобрено Советом по биоэтике Наффилда; В докладе говорится, что морально
РНК-интерференция (RNAi) – один из самых захватывающих и революционных новых подходов к терапии, который привлек значительное внимание в течение последних нескольких десятилетий. Было обнаружено, что
«Одеяло безопасности» для американских школьников Ответ преступнику с оружием заключается не в том, чтобы забрать его оружие, а в том, чтобы дать хорошему человеку оружие