Сочинение на тему Способы получения щелочной протеазы из штамма Bacillus cereus

Получение неочищенной щелочной протеазы из штамма Bacillus cereus S8 (MTCC NO 11901) осуществляли на статистически оптимизированной среде, дополненной мелассой, 1% (вес / объем); нитрат калия, 0,75% (вес / объем); солевой раствор, 5% (об. / об.); {MgSO4,7H2O 0,5% (вес / объем); KH2PO4, 0,5% (вес / объем)}; FeSO4,7H2O, 0,01% (вес / объем) и CaCO3, 0,5%, составленные [3].

Депротеинизация отходов креветок

Отходы креветок (50%, вес / объем) измельчали ​​и варили при 100 ° С в течение 20 минут для инактивации эндогенных ферментов. Приготовленный образец гомогенизировали в течение 2 минут в блендере Moulinex®. Отрегулируйте рН смеси до 10,0, а затем отработанные белки креветок переваривают сырой протеазой (208 ± 0,89 Ед / мл). Реакцию останавливали после 3 ч инкубации при 75 ° С, нагревая раствор в течение 20 мин при 100 ° С. Затем гидролизат отработанного белка креветок центрифугировали в течение 20 минут при 5000 g для разделения растворимых и нерастворимых фракций. Твердую фазу промывают дистиллированной водой и сушат в течение 1 ч при 60 ° С. Депротеинизация (DP) выражалась в процентах и ​​рассчитывалась по следующему уравнению, как описано Rao et al. (2000).

% DP = [(PO — O) – (PR — R)] — 100

PO — O

Где PO и PR – концентрации белка (%) до и после гидролиза; тогда как O и R представляют массу (г) исходного образца и гидролизованного остатка в пересчете на сухую массу соответственно.

Метод шелушения

Сырые шелковые нити сушили при 80 ° С до постоянного веса и затем обрабатывали протеазой штамма Bacillus cereus S8 при 70 ° С в буфере глицин-NaOH (рН 10,0) в течение 1 часа. Промыть обработанные волокна водой и высушить при 80 ° С. Разность в весе между обработанными и необработанными шелковыми нитями была измерена. Структуры обработанных и необработанных волокон наблюдали под сканирующим электронным микроскопом.

Определение потери веса

Потеря массы ткани была записана как потеря массы высушенного образца. Условия сушки были 80 ° С в печи с циркуляцией воздуха в течение 1 часа. Образцы взвешивали после охлаждения в эксикаторе. Следующее уравнение было использовано для расчета потери веса (мас.%):

мас.% = (“W1-W2” / “W1”) “x100”

Где W1 и W2 – веса ткани до и после обработки соответственно (Kalantzi et al., 2008).

Исследование волосяного покрова

Уход за шерстью козьей кожи, консервированной из поваренной соли, заготовленной на местном рынке, был разрезан на две части. Одна часть была выбрана для удаления волос с использованием сульфида извести, чтобы служить контролем в исследовании, а другая была взята для испытаний по применению ферментов. Шкуры пропитывали тремя сменами воды до тех пор, пока они не были очищены от грязи, навоза, крови и других загрязняющих веществ, а также от хлорида натрия, что проверялось раствором нитрата серебра. После замачивания шкурки складывали для слива воды примерно за час до нанесения. Контроль равномерно наносили на мякоть пастой извести (10%) и 3% сульфида натрия. Другой кусок погружали в 50 мл буфера глицин-NaOH (рН 10,0) с добавлением протеазы (206 ± 0,19 Ед / мл). После подачи заявления они уехали на ночь. На следующий день (примерно через 18 часов) шкуры снимали волосы вручную на деревянной балке с использованием ножа в соответствии с коммерческой практикой в ​​кожевенной промышленности, и эффективность удаления волос оценивали в соответствии с удаленным участком кожи в конце Процесс и качество кожи с волосами оценивали невооруженным глазом после лечения.

SEM исследования

Образцы размером 5–2 мм вырезали из идентичного места на контрольной коже и коже, обработанной ферментом, и устанавливали как вертикально, так и горизонтально на алюминиевых заглушках и напыляли золотом (JEOL, JSM-6610LV). Микрофотографии вида поверхности записаны.

Опасные растворы и моющая добавка