Экзосомы представляют собой наноразмерные внеклеточные везикулы, секретируемые большинством клеток [1], и отличаются по размеру, форме и молекулярному составу от других везикул, высвобождаемых из клетки [2]. Экзосомы имеют морфологию от круглой до чашечной с липидной бислойной мембраной и высвобождаются во внеклеточные пространства, а размер экзосом варьируется от 30 до 150 нм [3,4]. Помимо их наноразмерной морфологии, другие определяющие характеристики экзосом включают градиент плотности 1,13-1,21 г / мл [5] и белковые маркеры, такие как тетраспанины (CD9, CD63, CD81), Alix, Hsp70, Tsg101 [6]. Было установлено, что клетки могут выделять различные типы внеклеточных везикул, такие как экзосомы, эктосомы, микровезикулы и недавно идентифицированные крупные онкосомы [7], поэтому очень важно охарактеризовать экзосомы до любого экзосомного исследования [8]. Существует несколько методов, позволяющих идентифицировать и охарактеризовать экзосомы, включая электронную микроскопию (ЭМ), атомно-силовую микроскопию (АСМ), анализ нано-частиц (NTA), динамическое рассеяние света (DLS), вестерн-блоттинг и проточную цитометрию.
В последние несколько лет был огромный интерес к экзосомам из-за их использования в качестве инструмента биомаркеров для исследований рака. [10]. Несколько исследований показали существование экзосом с различным составом и биологической информацией в одной и той же популяции, которые по-разному влияют на клетки-реципиенты [2,11]. В последние годы белки экзосом, полученных из опухолей, были исследованы протеомикой на основе масс-спектрометрии для поиска потенциальных биомаркеров [12]. Например, в исследовании пациентов с меланомой экспрессия CD63 +, члена суперсемейства тетраспанина, показала значительное увеличение по сравнению со здоровым контролем [13]. В другом исследовании обнаружен повышенный уровень экспрессии еще одного члена семейства тетраспаниновых белков CD81 у пациентов с хроническим гепатитом С [14]. В любом протеомном исследовании концентрация белка в образце может иметь решающее значение, особенно если эксперимент основан на гель-электрофорезе, а количество экзосомного белка коррелирует с числом экзосом [15], но знание того, что общее количество белков достаточно для большинства время, но сообщалось, что некоторые применения требуют точного количества экзосомы в растворе, такого как использование экзосомы в качестве носителя для доставки лекарств, поскольку важно стандартизировать количество и размер экзосом для точных доз доставки лекарств. Помимо того, что это новый инструмент для исследования биомаркеров, экзосомы также использовались в качестве средства доставки терапевтических агентов благодаря их стабильности, способности преодолевать гематоэнцефалический барьер (BBB) и наличию в большинстве жидкостей организма. Количество экзосом является важным, поскольку оно помогает идентифицировать связи с родительской клеткой экзосомы, состоянием клеток и понимать сигналы экзосомы [16]. Например, при алкогольном гепатите наблюдалось увеличение количества экзосом и их количества микроРНК при тестировании на мышиной модели, получавшей алкоголь.
Клетки высвобождают экзосомы в биологических жидкостях во время их фазы роста для выполнения биологических функций, таких как передача генетических материалов и межклеточной коммуникации, иммунный ответ, удаление ненужных материалов из клетки [18]. Эти экзосомы поглощаются другими клетками из микроокружения [19]. Время пребывания экзосом в биологической жидкости варьируется между типами клеток, например, период полураспада экзосом из клеток меланомы B16 составляет 30 минут, и это наблюдалось, когда экзосомы были помечены флуоресцентным красителем для проверки их стабильности [20]. Принимая во внимание, что экзосомы из концентрата тромбоцитов человека показали период полураспада 5,5 часов [21]. В течение этого короткого периода времени экзосома кариесит различные белки и РНК в зависимости от клетки происхождения.
Целью данного исследования было выделить и охарактеризовать экзосомы из трех различных типов линий раковых клеток, линии клеток рака легких H358, линии лейкозных клеток THP1 и линии клеток рака молочной железы MCF7, количественно определить количество экзосом и паттерн экзосомных белков. во время их клеточного роста.
Мужчины очень долго правили в индустрии фитнеса. Не удивительно, что женщины в равной конкуренции соревнуются с мужчинами в индустрии фитнеса. Они также ищут идеальное тело,
Генитальный туберкулез – причина бесплодия среди женщин Вполне вероятно, что у каждого из нас был член семьи или знакомый, пострадавший от туберкулеза. Туберкулез является серьезной
Есть несколько разных циклов, вокруг которых вращается Земля. Некоторые из циклов были затронуты катастрофой Фукусима-Дайхатсу. Завод в Фукусиме пострадал от землетрясения силой 9,0 балла. Растения,