Сочинение на тему Анализ почв для изучения микробной биомассы и ферментативной активности пенджабских почв
- Опубликовано: 04.10.2020
- Предмет: Наука, образование
- Темы: Биология, Исследование, микробиология, Обучение
Отбор проб почвы будет производиться в разных районах Пенджаба и на участках, которые будут следовать одному из следующих севооборотов, а именно: пшеница-арахис, пшеница-рис, пшеница-хлопок, пшеница-грамм и система смешивания культур. Анализ будет проводиться в Университете аридного сельского хозяйства PMAS, Равалпинди.
Texture
К 40 г высушенной на воздухе почвы (<2 мм), добавили 40 мл 5% раствора гексаметафосфата натрия (NaHMP) и 150 мл деионизированной (DI) воды в химическом стакане. Накрыли подвеску часовым стеклом и оставили на ночь. После перемешивания в течение пяти минут с помощью высокоскоростной электрической мешалки количественно поместили содержимое в калиброванный цилиндр емкостью 1000 мл и увеличили объем до отметки, добавив воду. Хорошо перемешали суспензию в цилиндре с поршнем и вставили влагомер (ASTM 152 H) сразу после его снятия. Пена на поверхности суспензии в банке с гидрометром, полученная благодаря энергичному использованию плунжера, была диспергирована путем добавления одной капли амилового спирта. Первое чтение для ила плюс глина было взято после 40 секунд извлечения плунжера из суспензии. Еще раз смешали суспензию с поршнем, как и прежде, и оставили ее в покое после осторожного извлечения поршня. Через 4 часа был вставлен ареометр и было снято показание для глины. Наконец, процентные значения фракций песка, ила и глины были включены в треугольник ISSS, и был установлен текстурный класс почвы.
pH почвы
pH почвы будет определяться с использованием соотношения почвы и воды в суспензиях 1: 2,5 с использованием калиброванного pH-метра. 20 г почвы взвешивают в стакане на 100 мл, добавляют 50 мл дистиллированной воды и раствор перемешивают до получения однородной смеси. Окончательные показания будут отмечены путем добавления рН-метра.
EC почвы
Электропроводность образцов почвы будет определяться с помощью водной суспензии 1: 2,5. В 20 г высушенного воздухом грунта будет добавлено 50 мл дистиллированной воды, раствор будет смешан и окончательные значения будут измерены на EC-метре.
Общий органический углерод
В широкогорлую колбу Эрленмейера емкостью 500 мл добавляют 1 г почвы и 10 мл 1 н. раствора дихромата калия. Затем колбу мягко вращают, чтобы перемешать содержимое колбы. Затем быстро добавим 20 мл конц. H2SO4 в колбу и снова перемешивали в течение одной минуты, чтобы смешать почву и реагенты. Отложите колбу на 30 минут. После добавления 200 мл деионизированной воды и 10 мл конц. фосфорную кислоту (H3PO4), смесь в колбе оставляли охлаждаться. Затем содержимое колбы титровали против 0,5 н. Раствора сульфата железа (FeSO4) в присутствии индикатора о-фенантролина до развития красного / бордового цвета.
Азот нитрата
Салициловый метод будет использоваться для определения нитратного азота. 10 г почвы и 20 мл дистиллированной воды будут взяты в колбу Эрленмейера на 50 мл. Затем содержимое встряхивают в течение 1 часа и фильтруют через фильтровальную бумагу Whatman No.42. Берут аликвоту 0,5 мл и 1 мл 5% раствора реагента салициловой кислоты добавляют в пробирку и осторожно перемешивают, а пробирки оставляют на 30 минут. После этого в каждую пробирку добавляют 10 мл 4 М реагента NaOH. После смешивания пробирки оставляют на 1 час для развития полного цвета. Показания будут записываться с использованием спектрофотометра на длине волны 410 нм.
Извлекаемый фосфор
будет взят 5 г почвы; Будет добавлено 100 мл 0,5 М NaHCO3 и в течение примерно 30 минут встряхивается в колбе Эрленмейера объемом 250 мл. 10 мл фильтрата, 1 мл 5 н. NH 2 SO 4 будут добавлены в мерную колбу на 50 мл. Общий объем будет доведен до 40 мл путем добавления деионизированной воды. Гептамолибдат аммония, тартрат калия сурьмы и аскорбиновая кислота будут использоваться для придания цвета. Абсорбцию регистрируют через 10 минут с использованием спектрофотометра при длине волны 882 нм. Стандартная кривая будет разработана с использованием ряда стандартов для вычисления значения P по результатам считывания.
Извлекаемый калий
5 г почвы и 33 мл 1 N раствора ацетата аммония будут взяты в центрифужную пробирку на 50 мл и встряхнуты в течение 5 минут. Раствор будет центрифугироваться, пока не будет получена надосадочная жидкость. Затем супернатант разбавляют до 100 мл 1 н. Ацетатом аммония. Концентрация K в образцах будет определяться с использованием стандартной кривой, которая будет получена из значений оптической плотности серии растворов K с использованием пламенного фотометра.
Микробная биомасса углерода (MBC)
Для измерения содержания углерода в микробной биомассе и азота в микробной биомассе в пробах, отобранных для этой цели, была использована методика фумигации-экстракции (Vance et al., 1987). Две порции по 10 г влажного грунта (в пересчете на сухую массу) будут помещаться в герметичные стеклянные бутылки одновременно. Одна часть будет помещена в вакуумный эксикатор с открытыми крышками и перенесена в вытяжной шкаф. В нижней части эксикатора будут помещены две влажные ткани для восстановления влаги, уменьшенной в образцах в процессе фумигации. 30 мл не содержащего этанола хлороформа (CHCl3) с несколькими кипящими чипсами помещают в стеклянный стакан в центре эксикатора. После нанесения силиконовой смазки на края, а также на внутреннюю часть ручек эксикатора (чтобы обеспечить герметичность) крышка эксикатора будет закрыта и будет прикреплена к вакуумному насосу. Вакуумный насос будет включен, и стакан внутри эксикатора будет внимательно наблюдаться. Когда хлороформ в химическом стакане закипит, включится секундомер и процесс подачи вакуума будет продолжен в течение следующих 2 минут. Затем ручка эксикатора будет закрыта, вакуумный насос выключен, и образцы будут помещены в инкубатор на 24 часа при 25 ° C.
После фумигации CHCl3 будет удален из образцов путем повторных (шесть раз) откачек. Образцы будут экстрагированы в 40 мл 0,5 М сульфата калия (K2SO4) путем 30-минутного встряхивания при 200 об / мин, и фильтрат будет собираться с помощью Whatman no. 42 бумажный фильтр. Извлечение неочищенной 10-граммовой части почвы будет проводиться аналогичным образом в то время, когда началась фумигация. Все экстракты будут храниться при температуре -15 ° С в морозильной камере до анализа. Измерение содержания органического углерода в экстрактах будет производиться в форме CO2 путем инфракрасного поглощения после сжигания при 720 ° C с помощью анализатора общего органического углерода (Shimadzu Corp. Japan). Расчет MBC будет таким, как показано ниже:
MBC = Ec / kEC
Где Ec – это разница в органическом углероде, извлеченном из окуриваемых и не окуриваемых почв, и kEC = 0,45, доля убитой биомассы, минерализованной до CO2 в течение инкубационного периода.
Азот микробной биомассы (MBN)
Измерение общего N в экстрактах проводили в виде NO2 методом хемилюминесцентного детектирования с помощью модуля полного азота Shimadzu (TNM-1). Расчет биомассы N был следующим:
MBN = EN / kEN
Где EN – это разница между общим N в фумигированных и нефумифицированных почвах, kEN = 0,54, доля убитой биомассы, минерализованной в азот за инкубационный период.
Микробная биомасса фосфора (MBP)
Метод фумигации-экстракции использовался для измерения MBP почвы. Для этого предварительно инкубированную влажную почву разделяли на 3 порции по 2,5 г в сухом состоянии в печи и каждую из них экстрагировали 50 мл 0,5 М NaHCO3 при рН 8,5 после различной предварительной обработки. Одна порция / образец была обработана как обработка фумигацией (как описано выше), в то время как вторая часть была использована как обработка без фумигации. В третью часть добавляли фосфор при 25 мкг г-1 почвы, добавляя раствор KH2PO4 к экстрагенту, чтобы оценить P, сорбированный почвой в процессе фумигации-экстракции. Содержание фосфора анализировали методом Мерфи и Райли (1962). Расчет MBP был таким, как показано ниже:
MBP = EP / kEP
EP = (A – B) / (C – B) × 25
Где, A = фосфор в фумигированной почве, B = фосфор в нефумированной почве, C = фосфор в нефумированной колючей почве.
Уреазная активность
Для анализа активности уреазы в почве 5 г почвы забирают в колбу Эрленмейера (100 мл) и добавляют 2,5 мл раствора мочевины. Затем мы закроем колбу и инкубируем при 37 ° С в течение 2 часов. После инкубации добавляют 50 мл раствора KCl и встряхивают колбу в течение 30 минут. После фильтрации фильтрат будет проанализирован на содержание аммония. Заготовка будет выполнена, как описано выше, но с использованием 2,5 мл дистиллированной воды и добавит раствор мочевины в конце инкубации и непосредственно перед добавлением KCl. Для оценки содержания аммония в колбу Эрленмейера (50 мл) помещают 1 мл прозрачного фильтрата, затем добавляют 9 мл дистиллированной воды, 5 мл раствора салицилата Na / NaOH и 2 мл раствора дихлоризоцианида, и им дают выдерживают при комнатной температуре в течение 30 минут, и оптическая плотность будет измеряться при 690 нм.
Дегидрогеназная активность
Активность дегидрогеназы в почве будет определяться путем оценки скорости производства трифенилформазана (TPF) из трифенилтетразолийхлорида (TTC). Вкратце, 5 г почвы будут смешаны с 5 мл трифенилтетразолийхлорида (TTC) в пробирке. Содержимое будет перемешано и инкубировано в течение 24 часов при 30 ºC. Контроль должен содержать только 5 мл трис-буфера (без TTC). После инкубации 40 мл ацетона будет добавлено в каждую пробирку, и пробирки будут тщательно встряхиваться и далее инкубироваться при комнатной температуре в течение 2 часов в темноте. Затем почвенную взвесь фильтруют и измеряют оптическую плотность прозрачного супернатанта при 546 нм. Из-за светочувствительности трифенилтетразолия хлорида (ТТС) и трифенилформазана (ТПФ) все процедуры выполнялись при рассеянном свете.
активность щелочной фосфатазы
Активность щелочной фосфатазы в почве будет измеряться путем взятия 1 г почвы в колбу Эрленмейера (50 мл) и обработкой 0,25 мл толуола, 4 мл MUB (модифицированного универсального буфера, pH 11 для щелочной фосфатазы) и 1 мл раствора п-нитрофенилфосфата (PNP) вносят в тот же буфер. После остановки колбы содержимое перемешивают и инкубируют в течение 1 часа при 37 ° С. После инкубации добавляют 1 мл CaCl2 (0,5 М) и 4 мл NaOH (0,5 М). Мы будем смешивать содержимое и фильтровать почвенную взвесь через Ватман № 2v сложенная фильтровальная бумага. Для осуществления контроля, 1 мл раствора PNP будет добавлен после добавления 1 мл CaCl2 (0,5 М) и 4 мл NaOH (0,5 М) и непосредственно перед фильтрацией почвенной суспензии, а оптическая плотность будет измерена при 400 нм.
Мужчины очень долго правили в индустрии фитнеса. Не удивительно, что женщины в равной конкуренции соревнуются с мужчинами в индустрии фитнеса. Они также ищут идеальное тело,
Если взглянуть на школы в Ричмонде, штат Калифорния, и сравнить их со школами в Конкорде, штат Калифорния, можно увидеть огромную разницу. Мало того, что жилой
Преподавание существительных в важной области интересов в преподавании английского языка, которая всегда привлекала мое внимание и внимание моих учеников. Это обширная область, которая может связать